Тромбопластин. Плазменные компоненты тромбопластинообразования

Из испытуемых образцов крови готовили плазму, содержащую все плазматические факторы свертывания, плазму, адсорбированную гидратом окиси алюминия, которая содержит факторы VIII, XI и XII; сыворотку, которая содержит факторы VII, IX, X, XI и XII и плазму гретую до 60° в течение 20 мин, в которой из плазматических факторов тромбопластинообразования сохраняется только фактор XII. Активность этих реагентов испытывалась при их добавлении в количестве 0,05 мл к 0,1 мл контрольной плазмы и 0,05 мл суспензии каолина. После 2 мин инкубации при периодическом помешивании при 37° С смесь рекальцифицировали 0,1 мл раствора хлористого кальция, содержащего кефалин. Время свертывания является показателем активности соответствующих препаратов. Для сравнения вместо препарата из крови добавляли 0,85% раствор хлористого натрия.

 

Статистически обработанные результаты исследования сравнительной активности плазматических факторов тромбопластинообразования до и после кровопускания.

Два реагента: адсорбированная гидратом окиси алюминия плазма и гретая до 60° плазма, полученные после кровопускания на фоне укорочения времени свертывания крови в среднем с 1166 + 91 сек до 524 + 54 сек (Р < 0,001), давали более быстрое свертывание со стандартной плазмой, чем аналогично обработанные пробы крови, полученные до кровопускания.

 

На основании полученных данных можно заключить, что повышение свертываемости крови после кровопускания не обусловлено увеличением активности факторов VII, IX и X, так как путем адсорбции или нагреванием они были удалены из образцов плазмы, которые обнаруживают повышенную активность после кровопускания. Сыворотка же, в которой эти факторы хорошо сохраняются, после кровопускания сравнительно с нормой не проявляет более высокой активности. В соответствии с этим выводом находятся наши прежние данные о том, что предварительное введение дикумарина кроликам не предотвращает ускорения свертывания после кровопотери.

 

Поскольку адсорбированная гидратом окиси алюминия плазма после кровопускания давала более быстрое свертывание, чем нормальная (однако более медленное, чем цельная плазма и  даже физиологический раствор, что видно, например), чтобы выяснить возможную роль в возникновении повышенной свертываемости после кровопотери антигемофилического глобулина, было поставлено 10 опытов, в которых использовался количественный метод определения этого важного компонента в формировании тромбопластина плазмы

 

Количественное определение антигемофилического глобулина производили по методу Пул и Робинсон (1959) с описанными ниже изменениями, направленными на максимальное сохранение в испытуемой крови кроликов этого лабильного фактора.

 

Материалы. 1. 1,8 мл испытуемой крови из силиконированной канюли переносили в охлажденную пластмассовую центрифужную пробирку, содержащую 0,2 мл 3,2% раствора тринатрийцитрата. Форменные элементы отделяли центрифугированием при температуре — 1° С со скоростью 3000 об/мин в течении 10 мин, 20% плазму готовили путем добавления к 0,2 мл плазмы 0,8 мл 0,85% раствора хлористого натрия. В пластмассовых центрифужных пробирках к 1 мл 20% плазмы, предварительно выдержанной 1 мин на водяной бане с температурой 37°, добавляли 0,1 мл геля гидрата окиси алюминия. Смесь при постоянном встряхивании инкубировали на водяной бане еще 3 мин. Затем гидрат окиси алюминия отделяли центрифугированием 10 мин при температуре-1° со скоростью 3000 об/мин, а супернатант переносили в охлажденные несмачиваемые пробирки. Такую 20% адсорбированную плазму использовали для исследований.

  1. В качестве источника фактора VII и плазменного компонента тромбопластина использовали лиофилизированную сыворотку крыс.
  2. Кефалин (Белл и Элтон, 1954).
  3. Адсорбированную, осажденную бычью сыворотку, содержащую фактор V, готовили по Пулу и Робинсону.
  4. 0,025 М раствор хлористого кальция.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *